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023030 四硫磺酸钠煌绿增菌液基础(TTB)
(Tatrathionate Broth Base) (Muler-Kauffmann tetrathionate-novobiocin broth)(MKTTn)
用 途:
四硫磺酸钠煌绿增菌液基础用于沙门氏菌选择性增菌培养(GB 4789.4-2010,SN/T2206.1-2008和SN0170-92,ISO标准)。
原 理:
蛋白胨和牛肉膏粉提供碳源、氮源和维生素满足细菌生长的需求;氯化钠可维持均衡的渗透压;碳酸钙能中和细菌产酸及吸收有毒的代谢产物;硫代硫酸钠和四硫磺酸钠结合可抑制肠道共生菌(四硫磺酸钠是在培养基加入碘和碘化钾时形成),而具有四硫磺酸钠还原酶的细菌能在此培养基中繁殖;胆盐和煌绿可抑制大肠群菌和其它革兰氏阳性细菌。
培养基配方(每升):
蛋白胨 9g
牛肉膏粉 4.5g
氯化钠 2.7g
碳酸钙 40.5g
无水硫代硫酸钠 31.9g
牛胆盐 5g
最终pH7.0±0.2
使用方法:
1、称取本品93.6g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装于三角瓶中,每瓶100mL。
2、将三角瓶放入灭菌锅中,121℃高压灭菌20min,冷至30℃,每100mL基础培养基中加入四硫磺酸钠煌绿增菌液配套试剂(SR0040)2支配成四硫磺酸钠煌绿增菌液或再添加2支新生霉素(SR0030)配成MKTTn肉汤,混合均匀。
3、在无菌环境中,移取增菌液1mL转种于10ml TTB/ MKTTn中或移取前增菌液25ml转种于225ml TTB中。
4、将已接种的试管放入恒温培养箱中,42℃培养18—24h。
5、观察结果。
质量控制:
质控菌株接种后于42℃培养18-24h,结果如下:
贮 存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。
规 格:250g
参考文献:
1 GB/T4789.4-2003 中华人民共和国国家标准食品卫生微生物检验 沙门氏菌检验
2 GB/T4789.28-2003中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物检验 染色法,培养基和试剂
3 SN0170-92 中华人民共和国进出口商品检验行业标准 出口食品沙门氏菌属(包括亚利桑那沙门氏菌)检验方法
4 GB/T4789.4-2008 中华人民共和国国家标准食品卫生微生物检验 沙门氏菌检验
5 GB 4789.4-2010 中华人民共和国国家标准 食品安全国家标准 食品卫生微生物检验 沙门氏菌检验
6 SN/T2206.1-2008中华人民共和国进出口商品检验行业标准 化妆品微生物检验方法 第1部分:沙门氏菌
7 ISO 6579:2002 Microbiology of food and animal feeding stuffs-----Horizontal method for the detection of Salmonella spp.
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