甘露醇卵黄多粘菌素琼脂平板(MYP) 90mm*20个/盒

028381 甘露醇卵黄多粘菌素琼脂平板(MYP)

　　(Mannitol Yolk Polymyxin Agar plate)

　　用 途：

　　甘露醇卵黄多粘菌素琼脂平板用于蜡样芽孢杆菌的菌数测定及分离培养(GB/T4789.28-2003中4.64，GB/T4789.14-2003，SN0176-92和SN/T2206.2-2009，ISO标准)。

　　原 理：

　　蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素和生长因子;D—甘露醇为可发酵糖类;氯化钠维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;酚红为pH指示剂;卵黄含有卵磷脂，蜡样芽孢杆菌产生卵磷脂酶，在菌落周围产生沉淀环;并发酵D—甘露醇产酸使菌落显黄色;多粘菌素B可抑制杂菌的生长。

　　培养基配方(每升)：

　　蛋白胨 10g

　　牛肉膏粉 1g

　　D—甘露醇 10g

　　氯化钠 10g

　　琼脂 15g

　　酚红 0.025g

　　最终pH7.4±0.2

　　使用方法： (平板计数法)

　　1、样品的制备。

　　以无菌操作将检样25g(mL)用灭菌生理盐水或磷酸盐缓冲液做成10-1—10-5的稀释液。

　　2、取各稀释液0.1mL接种到MYP琼脂平板上，用灭菌L形玻璃棒均匀涂布于整个琼脂表面。每稀释度接种两个MYP琼脂平板。

　　3、将平板置于36±1℃培养12-20h。

　　4、选取适当菌落的平板进行计数。并计算同一稀释度两个平板的平均菌落数。

　　蜡样芽孢杆菌在MYP平板上生成的菌落为粉红色，环绕产生卵磷脂酶沉淀环。如反应不典型，可继续培养24h再计数。

　　5、计数后从每个平板上选取5个已计数的菌落，按有关操作进行证实实验。

　　6、根据证实实验确定为蜡样芽孢杆菌的菌落数，按比例计算出该皿内的蜡样芽孢杆菌菌落数，然后乘其稀释倍数，即得每克(或mL)样品所含蜡样芽孢杆菌数。例如MYP平板的可疑菌落为25个，取5个鉴定，证实为4个，乘上稀释倍数(如10-4)，再乘上1 g(或mL)检样数(取的是0.1mL样)则为：

　　25×4/5×10-4×10=2×106

　　质量控制：

　　质控菌株接种后于36±1℃培养24h，结果如下。

　　贮 存：贮存于4-8℃。贮存期三个月。

　　规 格：20个/盒

　　参考文献:

　　1. GB/T 4789.14-2003 中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物学检验 蜡样芽孢杆菌

　　2. GB/T 4789.28-2003 中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物学检验 染色法,培养基和试剂

　　3. SN 0176-92 中华人民共和国进出口商品检验行业标准 出口食品中蜡样芽孢杆菌检验方法

　　4. SN/T2206.2-2009 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 化妆品微生物检验方法 第2部分：需氧芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌

　　5. ISO7932：2004 Microbiology of food and animal feeding stuffs-----Horizontal method for the enumeration of presumptive Bacillus cereus-----Colony-count technique at 30℃