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022212 改良月桂基硫酸盐胰蛋白月示肉汤(MLST)
(Modified Lauryl Sulfate Tryptose Broth)
用 途:
用于奶粉中阪崎肠杆菌的检验的增菌和分子生物学检验方法(PCR)选择性增菌(GB 4789.40-2010和SN1632.2-2005、ISO标准)。
原 理:
胰蛋白胨提供碳源和氮源满足细菌生长的需求;氯化钠可维持均衡的渗透压;乳糖是大肠菌群可发酵的糖类;磷酸二氢钾和磷酸氢二钾是缓冲剂;月桂基硫酸钠和万古霉素可抑制革兰氏阳性细菌的生长。
培养基配方(每升):
胰酪胨 20.0g
氯化钠 34.22g
乳糖 5.0g
磷酸二氢钾 2.75g
磷酸氢二钾 2.75g
月桂基硫酸钠 0.1g
最终pH6.8±0.2
使用方法:
1、称取本品64.8g,加入蒸馏水或去离子水1000.0mL,搅拌加热煮沸至完全溶解,121℃高压灭菌15min,待基础培养基冷至30℃时,每100.0ml培养基基础加入配套试剂1支(SR0180)(万古霉素10.0mg),混合均匀。
2、取检样100g(或100ml)加入预热至44℃装有900ml缓冲蛋白胨水的锥形瓶中,用手缓缓地摇动至充分溶解,36℃±1℃培养18h±2h。移取1ml转接于10mlmLST-Vm 肉汤,44℃±0.5℃培养24h±2h。(GB标准)
3、取奶粉样品100.0克,加到已预热的(44℃)装有1000.0mMLST的2.0L三角瓶中,振摇使样品充分混匀后,在44±1℃恒温培养22~24小时。(SN和FDA方法)。
质量控制:
质控菌株接种后于44±1℃培养24小时结果如下:
贮 存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。
规 格:250g
参考文献:
1.SN1632.2-2005 中华人民共和国进出口商品检验行业标准 出口食品阪崎肠杆菌检验方法
2.GB/T4789.40-2008 中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物学检验 阪崎肠杆菌检验
3.GB 4789.40-2010 中华人民共和国国家标准 食品安全国家标准 食品卫生微生物学检验 阪崎肠杆菌检验
4 ISO22964-2006 Milk and milk products-----Detection of Enterobacter sakazakii
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