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沙门氏菌显色培养基
(Chromogenic Salmonella Agar )
用 途:
用于沙门氏菌的快速分离和鉴定。(GB4789.40-2010)
原 理:
蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;氯化钠可维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;胆盐抑制革兰氏阳性菌;选择性添加剂增强培养基的抑制杂菌的能力;混合色素分别与沙门氏菌和大肠菌群所对应的酶发生特异性反应,水解底物,释放出显色基团,在淡黄色平板上沙门氏菌产生品红色的菌落,大肠菌群产生蓝绿色的菌落。
沙门氏菌显色培养基配方(每升):
蛋白胨 19.6g
酵母膏粉 3g
氯化钠 5g
胆盐 1.5g
琼脂 12g
混合色素 6.4g
最终pH 7.0±0.2
使用方法:
1、称取沙门氏菌显色培养基47.5g,混合均匀加热至100℃,并按常规不断搅拌直至完全溶解(不能持续高温加热,建议不要重复煮溶),不需高压灭菌,冷至50℃,加入10支沙门氏菌选择性添加剂(冻干粉每支需先用1ml无菌水溶解),混匀,倾注灭菌平皿。
2、按国家标准、SN标准、FDA标准或其它方法制备样品液与增菌液。
3、建议使用二步增菌法:
(1)前增菌:将处理过的样品25g置于225mL缓冲蛋白胨水中,混合均匀后37℃培养6~8h;
(2)选择性增菌:取前增菌液1mL加入到9mL四硫磺酸钠煌绿增菌液(TTB)中,混合均匀后37℃培养18~24h;
4、用接种环取增菌液一环,划线接种于沙门氏菌显色平板上,置于36±1℃培养18-24小时。
5、观察结果。挑取显色平板上呈品红色,扁平透明,边缘光滑,直径约2mm的可疑菌落进行进一步的试验。
6、可使用MicrogenTMGN-ID或API20E或生化管试验,对疑似沙门氏菌菌落进行生化鉴定。
质量控制:
本品倾注平皿后呈淡黄色,下列菌株接种后于36±1℃培养18—24h生长情况如下表:
贮 存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期二年。
规 格:可配置1L的培养基干粉。
参考文献:
1.GB/T4789.4-2008 中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物检验 沙门氏菌检验
2.GB 4789.4-2010 中华人民共和国国家标准 食品安全国家标准 食品卫生微生物检验沙门氏菌检验
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