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027315 MRS培养基(莫匹罗星锂盐改良MRS培养基基础)
(Man Rogosa Sharpe Medium)(Li-Mupirocin Modified MRS Medium Base)
用 途:
MRS培养基用于乳酸菌的分离、计数和培养。(GB/T 4789.35-2010,SN/T1941.1-2007和ISO标准)
原 理:
蛋白胨、牛肉膏粉、酵母膏粉提供氮源、维生素、生长因子;葡萄糖为可发酵糖类;磷酸氢二钾为酸碱缓冲剂;柠檬酸三铵、硫酸镁、硫酸锰、吐温-80和乙酸钠为培养各种乳酸菌提供生长因子,其成分还能抑制某些杂菌;琼脂是培养基的凝固剂。
MRS培养基配方(每升):
蛋白胨 10g
牛肉膏粉 5g
酵母膏粉 4g
葡萄糖 20g
吐温-80 1.08g
磷酸氢二钾 2g
乙酸钠 5g
柠檬酸三铵 2g
硫酸镁(MgSO4.7H2O) 0.2g
硫酸锰(MnSO4.4H2O) 0.05g
琼脂 15g
最终pH 6.2±0.2
使用方法
1、称取本品64.3g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃高压灭菌15min,备用。
2、无菌操作将经过充分摇匀的检样25g(或25mL),放入含有225mL灭菌生理盐水的灭菌广口瓶内,振摇均匀,即为1:10稀释液,依次做1:100、1:1000……稀释。
3、将培养基凉至50℃左右,注入平皿中约15mL,待琼脂凝固。
4、选择2-3个合适的稀释度,分别在做10倍递增稀释的同时,吸取0.1mL稀释液于平皿上,用L型棒涂布,每个稀释度做2个平皿。翻转平板,乳杆菌在兼性厌氧条件,双歧杆菌在厌氧条件下,混合菌应分别兼性厌氧和厌氧条件下,36±1℃培养48h。
5、选择菌落数在30-300个之间的平皿进行计数,并乘以相应的稀释倍数,以10的指数表示进行报告。
质量控制:
下列质控菌株接种后于36℃±1℃兼性厌氧培养48h结果如下:
贮 存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。
规 格:250g
参考文献:
1.GB/T4789.35-2008 中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物学检验标准 乳酸菌检验
2.GB 4789.35-2010 中华人民共和国国家标准 食品安全国家标准 食品卫生微生物学检验标准 乳酸菌检验
3.SN/T1941.1-2007 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 进出口食品中乳酸菌检验方法 第1部分 分离与计数方法。
4.ISO 15214-1998 Microbiology of food and animal feeding stuffs-----Horizontal method for the emumeration of mesophilic lactic acid bacteria-----Colony-count technique at 30℃.
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